ComplementTech C3b說明書

名稱： iC3b

規(guī)格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書)

類型 冷凍液體

純度： >90%由SDS-PAGE

緩沖區(qū)： 10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺系數。 A280 nm在1.0 mg/mL時的=為1.03

分子量： 176000Da (3鏈)

防腐劑： 無，0.22µm過濾

存儲： - 7 0oC或以下。避免凍融。

根源 正常人血清 (經認證的HBsAg和HCV、HIV1和HIV-II抗體檢測 均為陰性) 。

預防措施 在處理人體血液制品時要采取常規(guī)的預防措施。

一般說明

iC3b (滅活的C3b) 來源于C3b。C3b向iC3b的轉化幾乎破壞了C3b上幾乎所有的 功能結合位點。C3b本身是由所有三種補體途徑(Law，S。K.A.和里德，K。B.M. (1995 ) )，當天然C3被裂解時，釋放C3a。在因子H存在的因子下，因子I對C3b進行裂解制備 iC3b。當C3b在溶液中游離時，H和I的裂解迅速，當它附著在表面時，速度較慢。如果 C3b切割到iC3b，因子I的其他輔助因子也允許切割，這包括兩個膜蛋白CR1 (CD35) 和 MCP (CD46) 。因子I可以在alpha鏈中的兩個位置切割C3b，如果兩個位點都被切割， 則釋放一個小片段 (C3f，2000Da) 。如果C3b前體附著在一個表面上，iC3b就會留在 那個表面上。本公司銷售的iC3b由流體相C3b制成，不能附著在表面上。表面結合的 C3b和iC3b通過共價鍵與目標相連，共價鍵可以是酯鍵，也可以是酰胺鍵。酯鍵是不穩(wěn) 定的，導致粒子逐漸釋放。在補體激活過程中產生的大多數C3b永遠不會附著在表面上 ，因為它的硫酯與形成水的流體相C3b發(fā)生反應。表面結合的iC3b及其分解產物C3d被 淋巴細胞和吞噬細胞上的許多受體識別，這些受體利用這些配體刺激吞噬作用和抗原 呈遞給適應性免疫系統(tǒng)的細胞。iC3b的受體分別是b細胞上的CR2 (CD21) 和吞噬細胞 上的CR3 (CD11b/CD18) (Dodds，A。W.和Sim，R。B.編輯 (1997) ；莫利，B。J.和沃 爾波特，M。J. (2000)).ic3b-受體相互作用的結果之一是靶標特異性b細胞和t細胞群 體的擴大。

物理特性和結構

分子量：17.6萬道爾頓， 由三個二硫鍵連接鏈組成。人的iC3b呈糖基化狀態(tài) ( ~值為2.8%) 。C3b的阿爾法啟動鏈被因子I切割，產生兩個片段 (63000和39000Da) ， 它們都與beta鏈 (75000Da) 相連，但沒有變化。根據因子I可能存在一些異質性 (Morley，B。J.和沃爾波特，M。J. (2000) ；法律，S。K.A.和里德，K。B.M. ( 199 5) ；多茲，A。W.和Sim，R。B.

編輯 (1997) ；摩根，B.P。ed. (2000)).如果因子I分裂兩次，C3f (2000Da) 被 釋放，其鏈約為61000、39000和75000Da。iC3b的pI約為。5.7.

功能

正如它的名字所暗示的， “滅活的C3b"失去了C3b表達的大部分功能。C3b具 有因子B、因子P、因子H、因子I、C5、DAF (CD55) 、MCP (CD46) 和受體CR1的結合 位點，而iC3b經歷了結構變化，破壞了許多這些位點(Gros，P.等。 (2008) ；多茲 ，A。W.和Sim，R。B.編輯 (1997) ；蘭布里斯，J。D. (1988)).最關鍵的是，iC3b 不能結合因子B，因此不能參與補體激活。然而，iC3b仍然可以通過結合C5參與C5轉 化酶的活性，它仍然可以結合正確蛋白，它已經獲得了與CR3受體相互作用的能力， 這對吞噬和t細胞帶t細胞反應的抗原呈遞很重要(Ghannam A等。(2008)).

測定

目前還沒有針對iC3b的功能檢測方法。SDS凝膠用于確定蛋白質的鏈結構。

在體內

在補體激活過程中，C3b產生于C3的蛋白水解裂解。在侵襲性補體激活過程中 (在膿毒癥和感染部位) 可能會形成高濃度的C3b，但大部分是液體期C3b。在血液中 ，因子H和I迅速裂解C3b形成iC3b。雖然iC3b對胰蛋白酶樣酶非常敏感，但它在血漿 或血清中的壽命很長 (半衰期數小時) 。由于血漿中含有過量的蛋白酶抑制劑，因此 游離凝血酶、纖溶酶或其他活性蛋白酶很少，iC3b仍然是iC3b。然而，在血液中，人 類紅細胞上的CR1受體誘導了因子I的第三次切割，從而從C3dg中釋放C3c(Dodds，a。 W.和Sim，R。B.編輯 (1997) )。