advancedbiomatrix 5010說(shuō)明書(shū)
目錄 #5010
Nutragen ®是一種 6 mg/ml 的 I 型牛去端膠原溶液，用于 2D 和 3D 細(xì)胞培養(yǎng)。由于濃度較高，Nutragen ®水凝膠將比其他濃度較低的膠原蛋白產(chǎn)品更強(qiáng)。
Nutragen ® 膠原蛋白被稱(chēng)為所有膠原蛋白的純度標(biāo)準(zhǔn)（> 99% 的膠原蛋白含量）、功能性和最天然的膠原蛋白。Nutragen ® 是從來(lái)自美國(guó)受控的封閉畜群的牛皮中分離出來(lái)的。Advanced BioMatrix 的制造工藝符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，這些標(biāo)準(zhǔn)已被證明可以產(chǎn)生批次間一致性。
Nutragen ® 膠原蛋白約 97% 為 I 型膠原蛋白，其余由 III 型膠原蛋白組成。Nutragen ® 膠原蛋白以大約 6 mg/mL 的濃度提供，以提供極其堅(jiān)固的凝膠。每個(gè)特定批次的濃度都在分析證書(shū)上提供，該證書(shū)可在購(gòu)買(mǎi)每種產(chǎn)品時(shí)獲得。Nutragen ® 可溶于 0.01 N HCl 中的去端膠原蛋白，因此其 pH 值約為 2.0。
Nutragen ® 膠原蛋白非常適合用于表面涂層，為培養(yǎng)細(xì)胞提供薄層制備，或用作固體凝膠。Nutragen ® 膠原蛋白以 50 毫升的體積提供，并包含在用戶(hù)友好的包裝中，以便使用和儲(chǔ)存。Nutragen ® 經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾，并以即用型溶液的形式提供。
| 參數(shù)、測(cè)試和方法 | Nutragen ® I 型膠原蛋白 #5010 |
| 滅菌方法 | 過(guò)濾 |
| 提取方法 | 酶 - 去端膠原 |
| 形式 | 解決方案 |
| 包裝尺寸 | 50 毫升、1000 毫升 |
| 貯存溫度 | 2-10°C |
| 保質(zhì)期 | 自收到之日起至少 6 個(gè)月 |
膠原蛋白濃度 - 雙縮脲 | 5.8-6.8 毫克/毫升 |
膠原蛋白純度 - 銀染 | > 99% |
| 酸堿度 | 1.9-2.1 |
| 動(dòng)力學(xué)凝膠測(cè)試（分鐘） | < 40 |
| 凝膠形成管測(cè)試（分鐘） | < 40 |
原纖維生成（吸光度單位） | > 0.5 |
電泳圖案 - 考馬斯藍(lán) | 特征 |
| 無(wú)菌 - USP 修改 | 沒(méi)有增長(zhǎng) |
| 內(nèi)毒素 - 鱟 | < 1.0 歐盟/毫升 |
| 滲透壓 (mOsmo H2O/kg) | < 35 |
| 細(xì)胞附著試驗(yàn) | 經(jīng)過(guò) |
| 來(lái)源 | 牛皮 |
| 水凝膠楊氏模量 E (Pa) | 特征 |
涂裝程序
注意：使用這些建議作為指導(dǎo)來(lái)確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳包被條件。
從瓶子中取出所需數(shù)量的膠原蛋白并分配到稀釋容器中。
將 Nutragen ® 在水中稀釋至 ~50 至 100 µg/ml (~1:30)。也可以使用 0.01 N HCl 溶液。
輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物，直到材料*混合。
將適量稀釋的 Nutragen ® 材料添加到培養(yǎng)表面，確保整個(gè)表面都被包被。
在室溫下孵育，蓋上蓋子 1-2 小時(shí)。吸出任何剩余的材料。或者，在室溫下孵育直至表面干燥。
孵化后，吸出任何剩余的材料。
用無(wú)菌培養(yǎng)基或 PBS 仔細(xì)沖洗涂層表面，避免刮傷表面。
涂層表面已準(zhǔn)備好使用。如果保持無(wú)菌狀態(tài)，它們也可以在 2-8°C 潮濕或風(fēng)干的條件下儲(chǔ)存。
3-D 凝膠制備程序
將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中，輕輕旋轉(zhuǎn)。
將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0–7.5。建議使用無(wú)菌 0.1 M NaOH。仔細(xì)監(jiān)測(cè) pH 調(diào)節(jié)（pH 計(jì)、酚紅或 pH 試紙）。
用無(wú)菌水將最終體積調(diào)整為總共 10 份。
為防止凝膠化，將混合物的溫度保持在 2-10°C。
要形成凝膠，請(qǐng)加熱至 37° C。為獲得最佳效果，凝膠形成需要大約 40 分鐘。
