qa-bio E-EF01-20說明書
E-EF01-20
從肽和蛋白質中選擇性釋放雙觸角聚糖
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Specsheet CoA SDS
部件號–酶量
E-EF02 – 60 µLs¹
E-EF02-20 – 20 µls¹
E-EF02-200 – 200 µls²¹
含緩沖液
²僅含酶
內切F2，內切糖苷酶F2，內切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶F2
Endo F2從糖蛋白上裂解N聯（天冬酰胺連接）雙觸角寡糖。它還可以切割高甘露糖聚糖，但切割速率降低40倍。其在寡糖的二乙酰基殼二糖核心中的兩個N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解，產生截短的糖分子，其中一個N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反，PNGase F可以完整清除寡糖。
內切糖苷酶F2對蛋白質構象的敏感性低于PNGase F，因此更適合天然蛋白質的去糖基化。但是，為獲得最佳結果，建議糖蛋白變性。
附加遠藤?F產品
內切糖苷酶F1釋放bianatennary和一些混合聚糖
內切糖苷酶F3將釋放triantennarry和巖藻糖基雙觸角N-聚糖
的遠藤?F多套件包括每個遠藤?F酶及其緩沖器的20個μLs。
源重組Elizabethkingia miricola（是腦膜膿毒性金黃）在大腸桿菌
EC 3.2.1.96
特異性
從肽和蛋白質中裂解所有天冬酰胺連接的雙觸角寡糖和高甘露糖（盡管降低了40倍）
內容
60的酶微升等分試樣（0.3 U）在10mM乙酸鈉的25mM NaCl，pH為4.5
包括20 µL和60 µL的包裝尺寸：
5x反應緩沖液– 250 mM乙酸鈉，pH 4.5
比活度> 20 U / mg
活度> 5 U / ml
分子量32,000道爾頓
建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體積調整為38 µl。
2.添加10 µl 5x反應緩沖液4.5。3
.添加2.0 µl Endo F2。在37°C下孵育1小時。
比活性
定義為在37°C，pH 5.5下1分鐘內催化1微摩爾變性豬纖維蛋白原釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監測裂解（裂解的纖維蛋白原遷移更快）。
儲存將酶保存在4?C下??。
穩定性正確存放后至少可穩定12個月。幾天暴露于環境溫度不會降低活性。
純度如下測試內切糖苷酶F2對蛋白酶的污染。將10μg變性的BSA與2μL酶在37oC下孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產宿主菌株已經過廣泛測試，不會產生任何可檢測的糖苷酶。
