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swant 7697說明書

 更新時間:2019-11-15 點擊量:1989

swant 7697說明書

產品名稱鈣網膜蛋白兔多抗 CR 7697

      英文名稱  Rabbit anti-calretinin

貨號  7697

批號 1893-0114

外觀 凍干粉

      溶解每管用200 µl雙蒸水溶解

規格200UL

產品描述

兔抗calretinin抗血清是用N末端含有6-his標記的重組人calretinin蛋白免疫家兔制備的。

該抗體為兔抗calretinin多克隆抗體[1],與鈣結合蛋白D-28k和鈣調素[2]都屬于EF-手性家族的鈣結合蛋白。7697鈣網膜蛋白特異表達于包括人、猴子、大鼠、小鼠、豚鼠,雞和魚的組織中(圖1)與鈣結合蛋白D-28k或其他已知的鈣結合蛋白不產生交叉反應,此特異性取決于改抗原在腦組織中的分布位置。

 

抗體特異性及效價:

1、生物素-親和素標記免疫組化檢測4%多聚甲醛(或10%福爾馬林緩沖液)固定的腦組織冷凍/石蠟切片;

2、免疫酶標記/免疫印跡驗證;

 

反應種屬:

 WB:小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、斑馬魚、食蟹猴、和雞。

 IHC:人,大鼠,小鼠

 

 經測試 應用:

 WBIHC-P/Fc,ELISA

 WB 免疫印跡; IHC :免疫組織化學; ELISA:酶聯免疫。

 

稀釋比例

免疫組化(IHC): 12'000 - 15'0004%多聚甲醛/福爾馬林固定組織的冰凍或石蠟切片。

免疫印跡(WB): 11'000 - 12'000

本說明書IHCWB采用的是生物素標記法,建議根據實驗方法及內容選擇合適的抗體稀釋比例。

 

儲存:

      解凍后分裝(如每管1ul5ul等)保存于- 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期頻繁使用保存于 4°C(增加

      0.01% 疊氮鈉) 避免反復凍融。建議分裝小份儲存。

 

應用

Calretinin可能屬于“觸發”鈣結合蛋白的一類。它主要出現在神經細胞亞群中,是間皮瘤的良好標志物[3,4]

 

免疫印跡(WB

1:不同種屬全腦組織蛋白抽提液用于SDS-PAGE Western blot檢測,結果表明所有種屬均可特異性檢測到分子量為29-30k Da的條帶。

 

1 2 3 4 5 6 7 8

. 1 7697鈣網膜蛋白對不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測結果。上樣順序依次為:1 小鼠;2 大鼠;3 豚鼠;4 兔子;5 食蟹猴;6 斑馬魚;7雞,8重組calretinin蛋白。WB結果表明,在所有物種中都能檢測到29kDa的條帶。

 

Calretinin基因敲除小鼠的免疫組織化學染色

Calretinin高表達于正常小鼠腦組織神經元(圖2a)calretinin基因敲除小鼠腦組織區域未見陽性表達(圖2b)

 

 

 2a正常小鼠腦組織7697鈣網膜蛋白免疫組化結果:陽性染色分散于大腦皮層神經元細胞。100 X鏡下

2b calretini基因敲除小鼠大腦7697鈣網膜免疫組化染色結果:未見大腦皮層神經元陽性染色。100 X鏡下

 

參考文獻

  1. Schwaller B., Buchwald P., Blümcke I., Celio M.R. and Hunziker W. (1994) Characterization of a polyclonal antiserum against the purified human recombinant calcium-binding protein calretinin. Cell Calcium 14: 639-648.
  2. Schiffmann S.N. et al (1999) Impaired motor coordination and Purkinje cell  excitability in mice lacking calretinin. PNAS, 96: 5257-5262.
  3. Gotzos V., Vogt P. and M.R. Celio (1995) Calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type. Pathol. Res. Pract. 192:137- 147.
  4. Doglioni, C. et al. (1996) Calretinin: a novel immunocytochemical marker for mesothelioma. Am. J. Surg. Pathol. 20:1037-1046.

 

 

 

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